Verfahren wie die miniaturisierte Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (LC) sind ideal geeignet, um den Verbrauch an Ressourcen zu verringern ohne dabei die Datenqualität im analytischen Labor negativ zu beeinflussen. Nichtsdestotrotz wird die Anwendbarkeit dieser Technik in der Routineanalytik aufgrund der Handhabbarkeit oftmals kritisch hinterfragt. Des Weiteren sind nur wenige Informationen bezüglich der theoretischen Leistungsfähigkeit dieser Trenndimension verfügbar. Aus diesem Grund ist das Ziel dieser Arbeit die Charakterisierung der Mikro-Flüssigkeitschromatographie (Mikro-LC) aus Sicht der Theorie und Praxis. Zur Bewertung wurde die Entwicklung einer schnellen Analysenmethode ausgewählter Zytostatika von Wischproben mittels Mikro-LC-MS/MS verwendet. Die untersuchten Analyten umfassen dabei sowohl polare als auch unpolare Substanzen. Weiterhin sind drei kritische Peakpaare enthalten, bei denen entweder eine Ionensuppression bei Koelution beobachtet wird oder eine Unterscheidung mittels Massenspektrometrie nicht möglich ist. Aus den genannten Gründen ist eine chromatographische Trennung notwendig. Um dies zu erreichen, wurden Mikro-LC-Säulen mit einem Innendurchmesser von 300 µm eingesetzt. Dies bietet neben dem reduzierten Verbrauch von Ressourcen den Vorteil, dass durch hohe lineare Fließgeschwindigkeiten ein erhöhter Probendurchsatz generiert werden kann. Um eine chromatographische Trennung zu erreichen, wurde ein geeignetes Phasensystem durch den Einsatz der Hauptkomponentenanalyse (PCA) identifiziert. Anschließend wurde die Effizienz miniaturisierter Trennsäulen mittels van Deemter und Kinetic Plot Analyse sowohl für die isokratische Arbeitsweise als auch für die Gradientenelution untersucht. Dabei stellte sich heraus, dass vollporöse Partikel mit einem Partikeldurchmesser von kleiner 2 µm (sub-2 µm) eine verbesserte Packungsqualität gegenüber größeren Partikeln unterschiedlicher Morphologie aufweisen. Weiterhin konnte festgestellt werden, dass im Vergleich zu konventionellen Innendurchmessern vergleichbare Packungsqualitäten erreicht werden können. Die Untersuchung der Peakkapazität für Gradientenlaufzeiten zwischen 5 s und 5 min ergab, dass mit vollporösen sub-2 µm Partikeln eine höhere Peakkapazität pro Zeiteinheit generiert werden konnte. Des Weiteren wurden neben dem Systemaufbau, die Extraktionseffizienz sowie die Ionenquellenparameter optimiert, um die Methode auf Basis der Mikro-LC-MS/MS zu etablieren. Durch diese Kopplung konnten die Komponenten innerhalb von 2.5 min bei einer Flussrate von lediglich 25 µL min-1 getrennt werden. Dadurch konnte der Probendurchsatz um den Faktor 2 bei gleichzeitiger Reduzierung der Ressourcen um 98% im Vergleich zur zuvor etablierten konventionellen LC-MS/MS gesteigert werden. Anschließend wurden Validierungsdaten erhoben, um die Sensitivität und Robustheit der entwickelten Methode im Routineumfeld zu demonstrieren. Anhand von Realproben aus Krankenhausapotheken wurde gezeigt, dass der Referenzwert für die Arbeitsplatzkontamination von Zytostatika von 0,1 ng cm-2 mittels der Methode überprüft werden kann. Damit konnte exemplarisch gezeigt werden, dass die Mikro-LC qualifiziert ist, die konventionelle LC-MS im Bereich der ultra-sensitiven Targetanalytik zu ersetzen.