Zusammenfassung Die Behandlung des malignen Glioblastoms mit einer Kombination aus Strahlen- und Chemotherapie ist eine der vielversprechendsten Behandlungsmöglichkeiten. Die hier vorgelegte Doktorarbeit beschäftigt sich mit den Mechanismen, die der strahleninduzierten Aktivierung der ASM und der Produktion von Ceramid in Glioblastomen zugrunde liegen. Der Fokus liegt dabei auf dem initialen Ereignis, dass die Aktivierung der Asm und die Produktion von Ceramid in humanen Glioblastom-Zellen einschließt. Die Bestrahlung von humanen Glioblastom-Zellen führt zur schnellen Aktivierung und Translokation der Asm zur Plasmamembran, was zum Clustering von Ceramid und zur Bildung von Ceramid-reichen Membranplattformen führt. Die vorliegende Arbeit untersucht den Mechanismus der ASM-Aktivierung und zeigt, dass dieser von der Produktion von reaktiven Sauerstoffspezies abhängt. Es ist bereits bekannt, dass Ceramid-reiche Membranplattformen aktiv Signalmoleküle akkumulieren, wie beispielsweise die Rezeptoren CD95 und CD40 (Cremesti et al 2001, Grassmé et al 2001a, Grassmé et al 2001b, Grassmé et al 2002a) oder Superoxid-generierende Moleküle wie die NADPH Oxidase bzw deren Untereinheiten gp91phox und p47phox (Bao et al 2010, Zhang et al 2007). Im Einklang mit diesen Beobachtungen zeigt die hier vorliegende Arbeit, dass gp91phox nach Bestrahlung in Ceramid-reichen Membranplattformen eingelagert wird, und dass die Inhibition von gp91 eine weitere ASM-Aktivierung verhindert. Diese Ergebnisse gehen konform mit den Erkenntnissen von Zhang und Kollegen, die zeigen konnten, dass Sauerstoffradikale, die von der NADPH-Oxidase generiert werden, die Asm in einem positiven Rückkopplungsmechanismus beeinflussen (Zhang et al 2008). Schließlich konnten mittels LC-MS/MS verschiedene Interaktionspartner der ASM, von Ceramid und von lipid rafts identifiziert werden: Flotillin-1 und Caveolin-1 wurden in bestrahlten Proben identifiziert, was nahelegt, dass die ASM nach Translokation zur Plasmamembran in Ceramid-reichen Membrandomänen lokalisiert ist Darüber hinaus konnten noch weitere Proteine in den lipid rafts von bestrahlten Zellen identifiziert werden. Dazu zählten unter anderem auch Dysferlin und Sortilin, deren Rolle beim Transport der ASM vom Lyososom zur Plasmamembran bereits für verschiedene Stimuli beschrieben wurde (Han et al 2012, Jin et al 2008b), jedoch bislang nicht für die Translokation nach der Bestrahlung.