Die chronische Infektion mit dem Hepatitis C Virus (HCV) ist unter anderem mit einer erhöhten Expression von Interferon sensitiven Genen (ISG) in der Leber verbunden. Die chronische Infektion mit dem Virus kann zur Entstehung von Leberfibrose, Leberzirrhose oder zum hepatozellulärem Karzinom (hepatocellular carcinoma, HCC) führen. Nicht-parenchymale Leberzellen (NPC) spielen in der angeborenen Immunabwehr und bei der Induktion der Immuntoleranz eine entscheidende Rolle. Ihre Funktion in der Abwehr gegenüber dem HCV ist nicht vollständig geklärt. In der vorliegenden Arbeit wurde die simultane Isolation von Hepatozyten, Kupffer Zellen (KC), lebersinusoidalen Endothelzellen (LSEC) und hepatischen Sternzellen (HSC) aus humanem Lebergewebe optimiert. Die kultivierten Zellen wurden im Hinblick auf ihre Morphologie, der Expression von zelltypspezifischen Markern sowie der zelltypspezifische Kontrolle der physiologischen Aktivität bewertet. Die hier verwendete Methode führte zu hoch reinen Primärzellpopulationen mit erhaltener physiologischer Aktivität in vitro. Anschließend wurde das TLR System in kultivierten KC, LSEC und HSC analysiert. Die Stimulation der TLR1-9 führte zur Aktivierung unterschiedlicher Signalwege. Hierzu zählt unter anderem die Aktivierung des Transkriptionsfaktors nuclear factor-kappaB (NF-κB) und des mitogenaktivierten Proteinkinase (MAPK) Weges (JNK, p38 und ERK1/2). Darüber hinaus führte die Stimulation der TLR1-9 in KC, LSEC und HSC zu einer zelltypabhängigen Produktion inflammatorischer Zytokine (Interleukin-6 (IL-6), Tumornekrosefaktor-α (TNF-α) und IL-10). Zur Untersuchung der antiviralen Aktivität von KC, LSEC und HSC wurde das Con1 HCV Replikonsystem verwendet. Die Stimulation von Con1 Zellen mit den Überständen von NPC, die zuvor mit TLR1-9 Liganden behandelt wurden, führte ausschließlich im Fall von TLR3 zu einer Suppression der HCV Replikation. Des Weiteren führte diese Stimulation zur Aktivierung des Transkriptionsfaktors interferon regulatory factor 3 (IRF3), der ein wichtiger Transkriptionsfaktor für die Induktion von Interferonen (IFN) darstellt. Die Stimulation mit dem TLR3 Liganden Poly I:C führte in allen drei Zelltypen zur Produktion von IFN-α, IFN-β, IFN-λ1 IFN-λ2 und IFN-λ3 sowie von ISG. Zur Identifikation von Mediatoren, die den antiviralen Effekt vermitteln, wurden Experimente zur Neutralisation von Typ I und Typ III Interferonen sowie deren Rezeptoren durchgeführt. Hierbei wurde festgestellt, dass der antivirale Effekt über den Typ I IFN Rezeptor verläuft. Allerdings wurde durch die Neutralisation von IFN-α und IFN-β der antivirale Effekt nicht aufgehoben, so dass nicht ausgemacht werden konnte, welches Typ I IFN für diesen Prozess verantwortlich ist. Um den Einfluss der HCV Infektion auf die TLR Sensitivität der NPC zu untersuchen, wurden Zellen aus HCV infizierten Patienten mit Zellen aus nicht infizierten Patienten verglichen. LSEC von HCV positiven Patienten reagierten auf die Stimulation mit dem TLR3 Liganden Poly I:C mit einer gesteigerten Genexpression von IL-6, IFN-β, IFN-λ1, IFN-λ2 und IFN-λ3, während in KC und HSC lediglich geringe Unterschiede im Fall von IL-6 und TNF-α festgestellt werden konnten. Zusammengefasst konnten in der vorliegenden Arbeit humane Hepatozyten, KC, LSEC und HSC mit einer hohen Zellzahl, einer hohen Reinheit und einer erhaltenen physiologischen Aktivität isoliert und kultiviert werden. Die kultivierten NPC zeigten eine funktionierende TLR Signaltransduktion, die zur Produktion von inflammatorischen Zytokinen und Interferonen führte. Ein antiviraler Effekt wurde ausschließlich nach der Stimulation des TLR3 vermittelt und scheint über die Produktion von Typ I Interferonen zu verlaufen. Die hier dargestellten Erkenntnisse geben Aufschluss über die Funktion der KC, LSEC und HSC in der Immunabwehr und Immuntoleranz gegenüber dem HCV.