Calciumphosphat-Nanopartikel für die Transfektion zur Synthese biologisch aktiver Proteine und zur Gen-Stummschaltung

Chernousova, Svitlana

In dieser Arbeit wurden Calciumphosphat-Nanopartikel und Calciumphosphat-Nanostäbchen als Nukleinsäure-Träger für die Transfektion von eukaryotischen Zellen untersucht. Es wurde gezeigt, dass die Zugabe des positiv geladenen Polymers Polyethylenimin (PEI) zu den Nukleinsäure-funktionalisierten Calciumphosphat-Nanopartikeln zu einer hohen Transfektionseffizienz führte. Die positiv geladenen Calciumphosphat-Nanopartikel und Calciumphosphat-Nanostäbchen übertreffen die negativ geladenen Partikel in der Transfektionseffizienz. Eine hohe Effizienz wurde sowohl bei der Transfektion als auch bei der Gen-Stummschaltung beobachtet. In-situ-Beobachtungen von mit Calciumphosphat-Nanopartikeln transfizierten Zellen wurden durchgeführt. Die Ergebnisse der time-lapse Mikroskopie zeigen, dass die Expression des hineingetragenen Gens für aktiv teilende Zellen mit der Mitose verknüpft sind. Weiterhin wurden die hBD-3-kodierender-DNA funktionalisierte Calciumphosphat-Nanopartikel hergestellt. Die Produktion von Defensin konnte nach der Transfektion im Zellkulturmedium mit Hilfe von ELISA nachgewiesen werden. Es wurde an unterschiedlichen Zelllinien in-vitro-Transfektionsuntersuchungen mit Calciumphosphat-Nanopartikel und -Nanostäbchen, die mit BMP-7- und VEGF-A-kodierender DNA funktionalisiert wurden, durchgeführt. Die Transfektion führte zur Produktion von BMP-7 und VEGF-A, was durch ELISA gezeigt werden konnte. Die beschriebenen DNA-funktionalisierten Calciumphosphat-Nanopartikel und Calciumphosphat-Nanostäbchen stellen vielversprechende Kandidaten für die Anwendung in weiteren in-vivo-Experimenten in Tier-Modellen und im Bereich der biologisch aktiven Knochenersatzmaterialien dar.

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Chernousova, Svitlana: Calciumphosphat-Nanopartikel für die Transfektion zur Synthese biologisch aktiver Proteine und zur Gen-Stummschaltung. 2015.

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