PT Unknown
AU Heseding, C
TI Characterization of the MYST histone acetyltransferase Mof2 in Drosophila melanogaster
PD 04
PY 2015
LA en
AB MYST Histoneacetyltransferasen sind bei Eurkaryoten weit verbreitet und finden sich von Hefe bis zu Drosophila melanogaster. Sie katalysieren die Übertragung von Acetylgruppen auf die Lysine von Histonen und bewirken dadurch die Veränderung der Chromatinstruktur und biologischer Prozesse wie Transkription oder DNA Reperatur. Auf Grund von Sequenzähnlichkeiten wurde Mof2 den MYST Histoneacetyltransferasen mit einer Spezifität für die Acetylierung von Histon H4K16 zugeordnet. Zu Beginn der Arbeit war außer der DNA Sequenz und Hochdurchsatzdaten zur Expression von mof2 nichts über Mof2 bekannt. 
Ein moderater knock-down von Mof2 durch RNAi hatte keinen Effekt auf die Lebensfähigkeit oder Fertilität von Fliegen. Eine stärkere Reduktion von Mof2 in einem hypomorphen Stamm führte zu einer Lücke auf dem Rücken von adulten Fliegen und hat seine Ursachen wahrscheinlich in einem Entwicklungsdefekt. Diese Arbeit zeigte, dass Mof2 in Embryonen, Larven, adulten Fliegen und den Hoden von Larven und adulten Fliegen vorhanden ist. Im Gegensatz zu vorherigen Daten ist Mof2 auch in S2 Zellen vorhanden. In Embryonen und polytänen Chromosomen ist Mof2 im Zellkern lokalisiert, während es in den Hoden im Zytoplasma nachgewiesen werden kann. Auf den polytänen Chromosomen findet sich Mof2 in ca. 80 % der Interbanden und kolokalisiert mit Z4/Putzig. Zusammen mit der durch bioinformatorische Auswertungen gefundene Kolokalisierung von Bindestellen von Mof2 mit den Bindestellen von dem Transkriptionsfaktor DREF und den Insulatorproteinen CP190 und dCTCF wäre eine Funktion von Mof2 bei der Regulation der Chromatinstruktur möglich. Bei der ebenfalls gefundenen Kolokalisierung von Bindestellen von Mof2/DREF mit BEAF-32 handelt es sich wahrscheinlich um eine antagonistische Bindung, die verschiedene Chromatinzustände abbildet. 
Genomeweite Untersuchungen der Bindestellen von Mof2 zeigten eine Anreicherung von Mof2 an Promotoren von Genen mit einer hohen Transkriptions. Obwohl auch eine temperaturabhängige Expression von mof2 nachgewiesen werden konnte, ist Mof2 nicht an der Hitzeschockantwort in den Speicheldrüsen beteiligt. Eine genauere Klassifizierung der Bindestellen von Mof2 durch eine GO Analyse zeigte, dass Mof2 bevorzugt an Promotern von Genen bindet, die an der Embryogenese beteiligt sind.
Die Enzymaktivität von Mof2 wurde in einem in vitro Assay untersucht. Dabei zeigte Mof2 eine Acetylierungsaktivität für Histon H4 mit unbekannter Spezifität. 
In dieser Arbeit konnte gezeigt werden, dass die MYST Histonacetyltransferase Mof2 wahrscheinlich an der Regulation der Transkription und der Chromatinstruktur beteiligt ist.
ER