@PhdThesis{duepublico_mods_00013741, author = {Ludwig Dr., Axel Erik}, title = {Untersuchungen zur G-Protein Interaktion der Variante G beta 3s mit G gamma-Untereinheiten}, year = {2006}, month = {Aug}, day = {23}, keywords = {G-Protein; Rezeptor; Beta-Untereinheit; Gamma-Untereinheit; Beta3s}, abstract = {G-Protein-gekoppelte Rezeptoren spielen eine herausragende Rolle bei der Vermittlung von Signaltransduktionsvorg{\"a}ngen. Hormone, Neurotransmitter und Wachstumsfaktoren aktivieren G-Proteine, welche aus drei Untereinheiten zusammengesetzt sind. In Zelllinien von Hypertonikern wurde ein Polymorphismus (C825T) im Gen GNB3 gefunden, welches f{\"u}r die G beta 3-Untereinheit kodiert. Es zeigte sich, dass dieser Polymorphismus mit der Expression einer mRNA-Spleissvariante von G beta 3 vorkommt, die als G beta 3s bezeichnet wird und bei der 41 Aminos{\"a}uren deletiert sind. Gegenstand dieser Arbeit war die eingehende biochemische Charakterisierung von G beta 3s im Hinblick auf die m{\"o}gliche Dimerbildung mit G gamma-Untereinheiten. Es wurde zun{\"a}chst gezeigt, dass die Expression von G-Protein Beta- und Gamma-Untereinheiten mit Hilfe von rekombinanten Baculoviren in Sf9-Zellen m{\"o}glich ist. Versuche zur stimulierten [35S]GTP gamma S Bindung belegten, dass diese in Sf9-Zellen transfizierten G-Proteinuntereinheiten funktionell aktiv sind. F{\"u}r G beta 1 gamma - Dimere konnte ein eindeutiger biochemischer Nachweis der Dimerbildung durch die Methode der Trysinspaltung gef{\"u}hrt werden. Bei dieser Methode wird die G beta-Untereinheit nach erfolgter Dimerisierung mit einer G gamma-Untereinheit vor Trypsinspaltung gesch{\"u}tzt, nicht jedoch die nicht dimerisierten G beta-Untereinheiten. Dieser biochemische Nachweis gelang jedoch nicht f{\"u}r G beta 3 gamma Dimere, obwohl funktionelle Untersuchungen die Bildung stimulierbarer G beta 3 gamma- und G beta 3s-Dimere nahe legen. Auch der Einsatz einer anderen Proteinase resultierte nicht in einem Schutz vor Spaltung. Es muss angenommen werden, dass diese biochemische Methode f{\"u}r den Nachweis von G beta 3 gamma-Dimeren nicht geeignet ist. Es ist denkbar, dass G beta 3gamma-Dimere eine andere dreidimensionale Struktur aufweisen als die {\"u}brigen G beta gamma-Dimere. M{\"o}glicherweise ist die verwendete Methode auch nicht sensitiv genug f{\"u}r den Nachweis von G beta 3 gamma-Dimeren. Die G beta 3 - Untereinheiten k{\"o}nnten somit eine biochemische Sonderstellung unter den G beta-Untereinheiten einnehmen.}, url = {https://duepublico2.uni-due.de/receive/duepublico_mods_00013741}, file = {:https://duepublico2.uni-due.de/servlets/MCRFileNodeServlet/duepublico_derivate_00014885/Promotion.pdf:PDF}, language = {de} }