@PhdThesis{duepublico_mods_00011082,
  author = 	{Kaiser Dr., Frank},
  title = 	{Identifizierung von Interaktionspartnern des Transkriptionsfaktors TRPS1},
  keywords = 	{TRPS1; Transkriptionsfaktor; TRPS; GATA; Transkription},
  abstract = 	{Das TRPS1 Gen kodiert f{\"u}r einen Transkriptionsrepressor. Mutationen oder eine Deletion dieses Gens verursachen die Tricho-Rhino-Phalangealen Syndrome. Die hier vorliegende Arbeit beschreibt Analysen zur Charakterisierung des TRPS1 Proteins. Durch in vitro Rekonstruktionen spezifischer in Patienten mit TRPS identifizierten Mutationen, konnte nur ein von urspr{\"u}nglich zwei vorhergesagten Kernlokalisierungssignalen als funktionell klassifiziert werden. Der Schwerpunkt dieser Arbeit lag in der Identifizierung von TRPS1-Bindeproteinen. Durch die Verwendung von zwei {\"u}berlappenden Trps1 Fragmenten konnten in einem Hefe Zwei-Hydrid System sieben potentielle Interaktionspartner gefunden werden. Der Einsatz unterschiedlicher Trps1 Fragmente in weiteren Hefe und biochemischen Systemen erm{\"o}glichte eine Eingrenzung der f{\"u}r diese Interaktionen erforderlichen Regionen auf unterschiedliche Bereiche innerhalb des Trps1 Proteins. In sich anschlie{\ss}enden immunchemischen Co-Pr{\"a}zipitierungen und Co-Lokalisierungsstudien konnten die Interaktionen der humanen Orthologe TRPS1 zu LC8a, RNF4 und TOPORS verifiziert werden. Mobilit{\"a}tsshift Experimente zeigten, dass sowohl LC8a als auch RNF4 das Bindeverhalten von TRPS1 zur GATA-Konsensus-Sequenz ver{\"a}ndern. Untersuchungen dieser Interaktionen in einem Luciferase-Reporter System ergaben, dass LC8a und RNF4 zu einer Reduktion bzw. Inhibition der TRPS1-vermittelten Repression in der GATA-abh{\"a}ngigen Transkription f{\"u}hrten. Die SUMO-E3-Ligase TOPORS zeigte dagegen keinen signifikanten Einfluss auf die transkriptionelle Funktion von TRPS1. Durch die Verwendung eines ? SUMO Antik{\"o}rpers in Western-Blot Analysen konnte eine m{\"o}gliche SUMOylierung von TRPS1 gezeigt werden. Untersuchungen zur intrazellul{\"a}ren Verteilung zeigten das endogene TRPS1 in zwei distinkten subnukle{\"a}ren Strukturen. Durch TRPS1+PML Co-Lokaliserungsstudien konnte ein geringer Teil des endogenen TRPS1 innerhalb der PML-Kernk{\"o}rperchen nachgewiesen werden, wobei die Charakterisierung der durch den gr{\"o}{\ss}eren Anteil an TRPS1 gebildeten Strukturen noch aussteht. Die hier vorgestellten Ergebnisse und weitere Analysen zur spezifischen subnukle{\"a}ren Verteilung und der noch nicht n{\"a}her untersuchten TRPS1-Interaktionen, k{\"o}nnen vielleicht zum Verst{\"a}ndnis der molekularen Mechanismen der TRP Syndrome beitragen.},
  url = 	{https://duepublico2.uni-due.de/receive/duepublico_mods_00011082},
  file = 	{:https://duepublico2.uni-due.de/servlets/MCRZipServlet/duepublico_derivate_00011841:TYPE},
  language = 	{de}
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